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本试剂盒采用简易法检测抗凝全血等样本中葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(6GPD)活性。

是红细胞G-6-PD催化葡萄糖-6-磷酸(G-6-D)生成葡萄糖-6-磷酸葡萄糖-δ-内脂，后者很快氧化成6-磷酸葡萄糖酸(6-PGA)，同时NAPD⁺被还原成NADPH，其反应公式如下：G-6-P+NAPD⁺→6-PGA+L-NADPH。在上述偶联反应中NADPH生成速率与样本中酶活性呈正比，通过分光光度计或自动分析仪在340nm处检测吸光度升高速率(ΔA/min)，升高速率(ΔA/min)与G-6-PD活性呈正比，直接计算酶的活性单位。

葡糖-6-磷酸脱氢酶(glucose 6-phosphatedehydrogenase，G-6-PD或G6PD)是糖酵解途径、柠檬酸循环以外的另一个葡萄糖分解途径的磷酸葡萄糖酸途径(磷酸戊糖途径)中的第一个酶(EC1.1.1.49)。

• 生理盐水、血红蛋白含量检测试剂盒
  
• 水浴锅或恒温箱、离心管、离心机、1mL微量石英比色杯、紫外分光光度计

• 红细胞比容又称红细胞压积，指红细胞占全血容积的百分比，反映红细胞和血浆的比例。红细胞比容正常值:37～50%，女低于男；生理意义是影响血黏度(带氧能力)的主要因素。
  
• 全血标本中G6PD活性在室温可以保存2天，4℃保存1周，-20℃保存1个月。但建议4℃保存10h，-20℃保存48h，以免活性下降。
  
• 溶血液样本G6PD活性不稳定，4℃保存8h，-20℃保存48h。
  
• 本试剂盒不提供Hb的测定试剂，需客户单独购买。
  
• 严重黄疸、脂血或溶血的血清，可能会引起测定管吸光度增高。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

• 准备溶血液：取新鲜抗凝血，3000g离心30min，可见血液各成分按重力不同而分层，上层淡黄色液体是血浆，下层不透明的暗红色血栓为红细胞，红细胞与血浆之间的一薄层白膜是白细胞和血小板，弃上清及白细胞层，用4℃预冷的生理盐水洗涤2次，每次取上清时，务必去除剩余的白细胞层，再加预冷的生理盐水配成含红细胞压积为30%的红细胞悬液，4℃保存8h，-20℃保存48h。临用前，以样本稀释液稀释20～25倍，即为溶血液。
  
• 配制NADP储存液：取18mg NADP溶解于1mL G6PD Assay buffer，充分混匀，配制成NADP储存液(18mg/mL)，-20℃保存备用。
  
• 配制检测工作液：取NADP储存液和G6PD Assay buffer，按NADP储存液(18mg/mL)∶G6PD Assay buffer=1∶99的比例混合，即为检测工作液。-20℃保存1个月有效。
  
• 配制G-6-P工作液：取G-6-P 1支溶解于G-6-P稀释液10mL即为G-6-P工作液，可分装成小份后，-20℃保存备用。
  
• 分光光度计检测：按照下表设置空白管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。对于量程比较大的比色杯，其加样量应相应增多，检测样本量则对应减少；对于量程比较小的比色杯，其加样量应相应减少，检测样本量则对应增加。
  

  加入物(μL)	空白管	测定管
  检测工作液(37℃预温)	880	880
  G6PD Assay buffer	20	－
  溶血液	－	20
  混匀，37℃孵育10min。
  G-6-P工作液	100	100
  混匀，分光光度计波长340nm，1mL微量石英比色杯光径1.0cm，立即以空白管调零，检测1～3min各管吸光度升高速率ΔA/min。